Jak darovat krev na syfilis: diagnostika onemocnění (ELISA, RPGA)

Průkaz specifických protilátek proti Treponema pallidum v krevním séru, slouží k potvrzení výsledků nespecifických testů na syfilis, screeningu na syfilis, vyšetření kontaktů a dárců krve.

Ruská synonyma

Lues, bledý treponema.

Synonyma Anglicky

Syfilis, pasivní hemaglutinační test; Syfilis, nepřímý hemaglutinační test; Treponema Pallidum Hemaglutination Assay, TPHA.

Metoda výzkumu

Nepřímý hemaglutinační test (IHA).

Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

Jak se správně připravit na studium?

Před darováním krve nekuřte 30 minut.

Obecné informace o studiu

Syfilis je sexuálně přenosná infekce způsobená spirochétou Treponema pallidum poddruh pallidum. Vstup této bakterie do organismu vede k rozvoji imunitní odpovědi, doprovázené tvorbou jak nespecifických („netreponemálních“), tak specifických („treponemálních“) protilátek. Průkaz protilátek proti T. pallidum tvoří základ pro laboratorní potvrzení syfilis. Podle typu protilátek stanovených v reakci se sérologické studie dělí na nespecifické („netreponemální“) a specifické („treponemální“). Pasivní hemaglutinační reakce (PHA) je „treponemální“ test, tj. test specifický pro T. pallidum.

RPGA je založena na fenoménu aglutinace erytrocytů, na jejichž povrchu se adsorbují antigeny T. pallidum (reagent RPGA), kdy je k nim přidáno sérum pacienta se syfilis obsahující specifické protilátky proti spirochétě. Takové protilátky se objevují v krvi pacientů se syfilidou 2 (IgM) a 4 (IgG) týdny po infekci. Je třeba poznamenat, že toto období lze prodloužit až na 6 týdnů. Proto je citlivost RPGA v primárním období syfilis poněkud nižší než citlivost této metody v sekundárním a terciárním období a je asi 86 %. Výhodou RPGA je jeho vysoká specificita (96–100 %), která umožňuje použití této analýzy jako konfirmačního testu po pozitivním výsledku jakéhokoli nespecifického, „netreponemálního“ testu (například antikardiolipinového testu, RPR). Senzitivita RPGA v sekundárním, terciárním období syfilis i u latentní syfilis je 99–100 %.

Senzitivita RPHA a dalších „treponemálních“ testů převyšuje citlivost nespecifických („netreponemálních“) testů, jako je mikroprecipitační reakce (MPR) s kardiolipinovým antigenem. Proto se v poslední době jako screeningový test na syfilis častěji používají treponemální testy, včetně RPGA. Pokud je screeningový test na syfilis pomocí RPGA pozitivní, měl by být proveden potvrzující test. V tomto případě se jedná o jakýkoli jiný „treponemální“ test, nikoli však o RPGA (například enzymatická imunoanalýza).

Výsledek RPGA zůstává zpravidla pozitivní i po léčbě syfilis. Výjimkou je situace, kdy byla terapie prováděna na samém počátku onemocnění. Protože výsledek zůstává pozitivní po celý život, není RPGA určeno pro diferenciální diagnostiku časné a pozdní syfilis. Ze stejného důvodu se tato studie nepoužívá k hodnocení účinnosti léčby onemocnění.

Po přidání séra od pacientů se syfilidou k reagencii RPGA dochází k aglutinaci (slepení) a vysrážení erytrocytů. Stupeň aglutinace závisí na koncentraci protilátek v séru, takže RPGA umožňuje nejen detekovat přítomnost protilátek, ale také stanovit jejich množství. Výsledek analýzy je prezentován jako titr protilátky. Jakýkoli pozitivní titr indikuje možnou infekci T. pallidum, ale jsou možné falešně pozitivní reakce. Pro sekundární a latentní časnou syfilis jsou typické výrazně zvýšené četnosti.

Falešně pozitivní výsledky RPGA jsou pozorovány v 0,05-2,5 % případů a jsou nejčastěji způsobeny přítomností autoprotilátek v séru pacienta (u systémových onemocnění pojiva, jako je systémový lupus erythematodes), protilátek proti jiným patogenům podobných antigenní strukturou na T. pallidum (Borrelia burgdorferi, saprofytické treponemy dutiny ústní a genitálu), ale i další fyziologické a patologické stavy (těhotenství, nádorové onemocnění, akutní infarkt myokardu). Titr falešně pozitivní reakce RPHA je zpravidla nízký. Výjimkou jsou výsledky RPGA u pacientů s difuzními onemocněními pojiva a maligními novotvary, kdy titr protilátek může dosahovat velmi vysokých hodnot. Falešně pozitivní reakce se stávají negativními spontánně a beze stopy během 4-6 měsíců (akutní falešně pozitivní reakce, často během těhotenství) nebo po delší dobu (chronická falešně pozitivní reakce).

Vzhledem k těmto vlastnostem by měl být výsledek RPGA interpretován s přihlédnutím k dalším anamnestickým a laboratorním údajům. Pokud se potvrdí diagnóza syfilis, je nutné vyloučit přítomnost jiných sexuálně přenosných infekcí a také vyšetřit všechny sexuální partnery a rodinné příslušníky pacienta.

K čemu slouží výzkum?

• Pro potvrzení diagnózy syfilis, když je nespecifický screeningový test pozitivní;
• pro screening na syfilis;
• vyšetřovat osoby, které byly v sexuálním kontaktu nebo v blízkém domácím kontaktu s pacientem se syfilidou;
• k vyloučení syfilis u dárce krve.

Kdy je studium naplánováno?

• pacient s klinickými příznaky syfilis (nebolestivý erozivní nebo ulcerózní defekt na tvrdém podkladu) a regionální lymfadenopatie (primární syfilis), polymorfní kožní vyrážka, multifokální nebo difuzní alopecie, syfilitická leukoderma (sekundární syfilis), hustá elastická uzlina s rozpadem popř. tvorba „suché“ jizvy (terciární syfilis);
• osoby, které byly v sexuálním kontaktu nebo v blízkém domácím kontaktu s osobou se syfilidou;
• dárce krve;
• při každoroční preventivní prohlídce, hospitalizaci a registraci zdravotního průkazu.

Co znamenají výsledky?

Referenční hodnoty: negativní.

Důvody pro pozitivní výsledek:

• primární, sekundární, terciární a latentní syfilis (získaná a vrozená);
• těhotenství;
• HIV infekce;
• hepatitida B a C;
• injekční užívání drog;
• akutní infarkt myokardu;
• difuzní onemocnění pojivové tkáně;
• recidivující horečka;
• leptospiróza;
• borelióza přenášená klíšťaty;
• tropické treponematózy (yaws, bejel, pinta);
• zánětlivé procesy způsobené saprofytickými treponemami dutiny ústní a genitálií;
• zhoubné novotvary;
• rozsáhlá traumata a zlomeniny;
• bakteriální endokarditida;
• tuberkulóza;
• infekční mononukleóza;
• postvakcinační reakce.

Důvody negativního výsledku:

• nepřítomnost syfilis;
• první 2-4 týdny po infekci T. pallidum;
• Nesprávný sběr materiálu pro výzkum.

Co může ovlivnit výsledek?

• Výsledek testu může být falešně negativní během prvních 2-4 (až 6) týdnů po infekci.

Důležité poznámky

• Studie neumožňuje diferenciaci;
  • syfilis (T. pallidum) a další treponematózy (T. pallidum subspecies pertenue, endemicum, carateum);
  • raná a pozdní syfilis.

  Také doporučeno

  • Syfilis RPR (antikardiolipinový test/mikroprecipitační reakce), titr
  • Treponema pallidum, IgM, titr
  • Treponema pallidum, IgG, titr
  • Treponema pallidum, IgG v mozkomíšním moku
  • Treponema pallidum, protilátky
  • HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (stanovení protilátek proti HIV typu 1 a 2 a antigenu p24)
  • Virová hepatitida B. Sledování virové aktivity před zahájením léčby
  • Virová hepatitida C. Testy pro primární detekci onemocnění. Prověřování kontaktů
  • Intimní – optimální – analýza stěru pro muže
  • Intimní – optimální – analýza stěru pro ženy
  • Hospitalizace v chirurgické nemocnici
  • Hospitalizace v terapeutické nemocnici

  Kdo si studium objedná?

  Dermatovenerolog, neurolog, praktický lékař, epidemiolog.

  Literatura

  • French P, Gomberg M, Janier M, Schmidt B, van Voorst Vader P, Young H; IUST. IUSTI: 2008 European Guidelines on Management of Syphilis. Int J STD AIDS. květen 2009;20(5):300-9.
  • Seña AC, Bílá BL, Sparling PF. Nové sérologické testy Treponema pallidum: změna paradigmatu ve screeningu syfilis pro 21. století. Clin Infect Dis. 2010. září 15;51(6):700-8.
  • Luger A. Diagnóza syfilis. Býčí světový zdravotní orgán. 1981;59(5):647-54.
  • Holmes KK pohlavně přenosné choroby / KK Holmes, PF Sparling, WE Stamm; 4. vyd. — McGraw-Hill, 2008.

  Syfilis je chronické pohlavní onemocnění způsobené patogenní bakterií Treponema pallidum. Infekce proniká do lidského těla při pohlavním styku s dárcem, mnohem méně často „bezkrevní“ každodenní cestou, například když se syfilitická dáseň nebo ulcerózní frakce náhodně dostanou do kontaktu s předměty, které pacient používá společně.

  Syfilis má několik fází vývoje: inkubační, primární, sekundární a terciární.

  V závislosti na fázi se projevuje klinicky:

  • chancres – tvrdé vředy na kůži a sliznicích s ohniskovou lokalizací na genitáliích, jakož i v břiše a stehnech;
  • zánět regionálních lymfatických uzlin;
  • u těžkých forem poruchy pohybového aparátu a nervové činnosti.

  V inkubační (latentní) formě může onemocnění přetrvávat asi 3-4 týdny.

  Test na syfilis je nezbytný, pokud se objeví příznaky pohlavní povahy:

  1. zánětlivé útvary na genitáliích, v konečníku nebo orofaryngu – vředy, výrůstky, papilomy, kondylomy, eroze, skvrny;
  2. charakteristická vyrážka na těle, dlaních nebo chodidlech;
  3. plešatost;
  4. zvětšení lymfatických uzlin, především v tříslech.

  Ale i při absenci příznaků lékaři důrazně doporučují provést krevní test na syfilis, pokud žena nebo muž:

  • má spontánní pohlavní styk a nepoužívá antikoncepci;
  • přichází do každodenního kontaktu s osobou infikovanou treponémem;
  • podstoupí komplexní vyšetření na pohlavně přenosné choroby;
  • připravuje se na plánovanou hospitalizaci, operaci nebo lékařský zákrok, jako je endoskopie, zubní implantáty, odstranění kožních výrůstků;
  • plánuje početí, nošení a porod zdravého dítěte;
  • plánuje vstoupit do vzdělávací instituce nebo vstoupit do armády;
  • přeje si získat oficiální povolení žít a pracovat v Rusku.

  V jakékoli moskevské pobočce kliniky Private Practice můžete podstoupit úplnou diagnostiku syfilis: anonymně, rychle, pohodlně, levně.

  Ceny testu na syfilis

  Nejjednodušší analýza v expresním režimu, která stojí pouhých 500 rublů, odhaluje v krvi přítomnost specifických protilátek, které tělo produkuje v reakci na bledý treponém. Nenechte se tedy trápit pochybnostmi a přemýšlením, zda jste nechytili infekci. Odpověď na tuto otázku obdržíte do 20 minut spolu s výsledkem urgentního testu.

  Pamatujte, že plýtváním časem mrháte svým zdravím!

  Náklady na diagnostiku syfilis v naší laboratoři

  číslo	Analýza	Uzávěrka	Stát
  1	Expresní analýza na syfilis	20 minut	500 rublů.
  2	Mikroreakce	1 den	600 rublů.
  3	Pasivní hemaglutinační reakce	1 den	900 rublů.
  4	Enzymová imunoanalýza na Ig G	1 den	900 rublů.
  5	Enzymový imunotest na Ig M	1 den	900 rublů.
  6	Imunoenzymová analýza na celkové protilátky proti Treponema pallidum	1 den	900 rublů.
  7	PCR na syfilis	1 den	300 rublů.
  8	RIF (imunofluorescenční reakce) 200	3–4 dny	Provádí se pouze v expertním diagnostickém komplexu pro syfilis 8250 XNUMX RUB.
  9	RIF (imunofluorescenční reakce) abs
  10	RIBT (imobilizační reakce světlého treponemu)
  11	Wassermanova reakce rw	Bohužel je nyní z diagnózy syfilis odstraněn. Provádí se jen část – mikroprecipitační reakce, RPR, VDRL. Stojí 600 rublů.

  Biomateriál pro analýzu:

  • Pro laboratorní vyšetření se pacientovi odebírá především žilní krev;
  • při kožních příznacích je nutný buněčný seškrab z oblasti postižené erozí, vředy, kondylomy atd. PCR test zaručuje vysoce přesné kvalitativní a kvantitativní posouzení patogenního pozadí;
  • Pokud existují předpoklady pro neurosyfilis, pak se vyšetří mozkomíšní mok.

  Existují dva nejtěžší případy, kdy je velmi důležitý komplexní přístup k diagnostice, včetně schopnosti lékaře správně operovat výsledky.

  Za prvé: infekce pronikla do těla velmi nedávno a je ve fázi inkubace. Většina testů je negativních, i když invazivní proces postupuje.

  Za druhé: osoba, která prodělala syfilis, bude mít vždy pozitivní pozadí pro treponém, takže identifikace nové infekce je výrazně obtížnější.

  Pro každou klinickou anamnézu existuje soubor sérologických reakcí, které poskytují maximum informací o syfilis. Diagnostický program je vypracován individuálně pro každého pacienta. Vyvíjí a dohlíží na něj venereolog. Podílí se také na dešifrování výsledků.

  Expresní test na syfilis

  Naléhavé informace o infekci treponemem jsou potřebné k uklidnění pacienta, který měl příležitostný sex. Ještě důležitější je zachytit nemoc na začátku jejího postupu.

  Zcela bezpečnou expresní analýzu na syfilis lze provádět téměř denně v kombinaci s jinými typy laboratorní a hardwarové diagnostiky. Je vhodný i pro průběžné sledování účinnosti již předepsané léčby.

  Postup odběru krve imunochromní metodou netrvá déle než půl hodiny. Odebraný vzorek je odeslán do odstředivky, kde je rozdělen na frakce. Izolované sérum je umístěno do testovacího systému, který umožňuje identifikaci protilátek produkovaných imunitním systémem v reakci na infekci syfilis.

  Výsledek je poskytován v jedné ze tří možností

  1. Negativní. Nebyly zjištěny žádné protilátky. Neexistuje žádná syfilis.
  2. Pozitivní. Jsou přítomny protilátky. Zjištěna infekce.
  3. Pochybný. Jeho spolehlivost je z různých důvodů nejasná.

  Pokud výsledky neodpovídají aktuálnímu stavu pacienta, prohloubí lékař vyšetření předepsáním podrobného sérologického vyšetření složitějšími metodami: ELISA, RPGA, RIF, MRP, RIBT.

  RIF a RIBT pro syfilis

  Imunofluorescenční reakce (IF) a bledá imobilizace treponema (TPI) jsou těžkým dělostřelectvem v boji za pravdu ve složitých a matoucích případech s etiologií syfilis. Expertní testy umožňují objasnit většinu rozporů, které vznikají v důsledku jiných rozborů.

  Metody těchto studií jsou drahé a pracné. Jejich podstatou je kultivace kolonie patogenů z odpovídajících molekulárních fragmentů biomateriálu odebraného k analýze. Ale bledé treponemy nevnímají chemické prostředí. Pro svůj vývoj vyžadují přirozenou mikroflóru, proto se pěstují v králičích vejcích.

  Vysoká cena analýzy je způsobena vysokými náklady na činidla. Ne každá klinika v Moskvě to provádí. Máme vzácný test, který lze podstoupit kterýkoli den.

  Imunofluorescenční reakce

  Infekci zachytí v nejranějších stádiích, již ve třetím týdnu od okamžiku infekce. Provádí se v několika variantách:

  1. RIF abs. Absorpční test je nejcitlivější na infekci. Ale není to úplně správné pro kontrolu v postterapeutickém období, protože dává ostře pozitivní reakci po dlouhou dobu.
  2. RIF 200. Test s ředěním krevního séra (200x) reaguje citlivěji na změny infekčního obrazu. Je vhodný pro monitorování terapie, protože přesněji zaznamenává proces obnovy.
  3. RIF LgM, RIF LgG. Testy na imunoglobuliny IgM a IgG se používají extrémně zřídka, hlavně pro diagnostiku vrozených forem syfilis. Necvičíme je.

  Výsledek RIF je uveden v „křížcích“: silně pozitivní – 4+; pozitivní – 3+; slabě pozitivní – 2 +; pochybné – 1+.

  Imobilizační reakce Treponema pallidum

  RIBT – specifická analýza. K jeho provedení jsou z odebraného vzorku izolovány živé patogeny a imobilizovány vystavením protilátkám ze séra infikované krve pacienta. Tento test odhalí treponém v pozdní fázi – 2 měsíce po proniknutí infekce do těla. Pozitivní dynamika testu po léčbě se pomalu zvyšuje. Již 50% snížení invazivních ukazatelů svědčí o účinnosti terapie.

  Pozor! Na klinice Private Practice se analýzy RIF a RIBT neprovádějí samostatně, ale pouze v rámci komplexní expertní diagnostiky.

  Mikroreakce na syfilis

  MR testy jsou založeny na nespecifické metodě průkazu bakterií syfilis. Jeho reakce je pozitivní pouze v případě, že je přítomna nemoc. Při zotavování je odpověď záporná.

  Podstatou studie je detekovat protilátky, které reagují na kardiolipin, složku vnitřní membránové struktury bakterie. Protilátková reakce je detekována v primární fázi syfilis v 85 % případů. V sekundární fázi dává analýza kladnou odpověď v 97 % případů. Test je široce používán při odběru dárcovské krve.

  Metody MR mají značné nevýhody:

  • nerozpoznají infekci v prvních dvou týdnech;
  • dát nesprávné výsledky, pokud pacient zneužívá tučné potraviny;
  • mimo komplexní laboratorní studii nedávají smysl, protože mají vysoké procento falešně pozitivních výsledků, zejména během těhotenství a některých chronických patologií.

  V současnosti nejstarší rychlá analýza RMP, založená na mikroprecipitační reakci, je po vyloučení Wassermanovy metody komplementární vazby téměř jedinou dostupnou nespecifickou studií v komplexu sérologických reakcí.

  RPR test

  Test RPR na syfilis (moderní modifikace RW) je netreponemální metoda k průkazu antisyfilisových tělísek. Identifikuje titry protilátek a poskytuje jejich kvantitativní hodnocení přibližně 7-14 dní po vytvoření tvrdého chancre, tedy po měsíci od začátku invaze.

  Z nemocných buněk pacienta se uvolňují fosfolipidy, na které tělo produkuje imunoglobulinová tělíska IgG a IgM.

  Moderní verze Rapid Plasma Reaginsovy reakce má velký význam ve venerologické praxi. Je doporučován ruským ministerstvem zdravotnictví k hromadnému screeningu populace a ke sledování průběhu antisyfilisové terapie.

  Primární syfilis je detekován u 75 % testovaných pacientů v sekundární formě, analýza dává 100% účinnost.

  Výhody nespecifické RPR techniky:

  1. extrémně vysoká citlivost;
  2. pohodlné používání, postavené na hotové standardní soupravě;
  3. rychlé výsledky, jednoduché standardizované dekódování;
  4. pohodlí pro hromadné použití.

  Lékařské indikace pro RPR:

  • primární podezření na syfilis podpořené pozitivní reakcí na jakýkoli specifický test;
  • hromadné screeningové testování;
  • testování dárcovské krve v kombinaci s treponemálním testem;
  • diagnóza latentní formy, pokud jsou dva treponemální testy pozitivní.

  Krev se daruje pouze nalačno. Poslední jídlo by mělo být nejpozději 6 hodin před zákrokem. Několik dní před testem musíte omezit intenzitu fyzické aktivity a vyhnout se tučným, kořeněným, smaženým a slaným jídlům.

  Test na protilátky proti syfilis

  Metoda enzymového imunotestu pro identifikaci antitreponemálních tělísek je klasifikována jako specifická. Dnes je považován za nejpřesnější a nejcitlivější vůči zákeřnému patogenu.

  Test se provádí ve třech verzích: pro IgM imunoglobulin, pro IgG imunoglobulin a pro celkovou statistiku antitreponemální flóry.

  Analýza ELISA detekuje i zanedbatelné množství protilátek, což umožňuje rozpoznat přítomnost infekčního ložiska na samém počátku jeho vývoje.

  Díky těmto rozborům je možné získat jasný obraz o onemocnění v komplexu: identifikovat infikované, určit dobu trvání a formu onemocnění.

  Metoda ELISA má řadu výhod:

  • reaguje na invazi dříve než jiné testy;
  • přesně diagnostikuje relaps;
  • je téměř nikdy nepravdivý;
  • může potvrdit nebo vyvrátit výsledky jiných alternativních testovacích reakcí.

  Ale jsou tu i nevýhody. Technika je náročná na práci. Na výsledky si musíte počkat několik dní. Jako každý specifický test, ELISA neposkytuje přesné informace o zotavení, protože zůstává pozitivní po dlouhou dobu na pozadí onemocnění. Nejčastěji se tato analýza provádí v kombinaci s jinými metodami.

  Kde se nechat otestovat na syfilis v Moskvě?

  Na klinice Private Practice se můžete objednat na diagnostiku na dálku ve vhodnou dobu. Čekáme na vás na kterékoli z našich hlavních poboček: na Chistye Prudy nebo Varshavka.

  Pod dohledem zkušeného venerologa absolvujete diagnostiku a léčbu na jednom místě.

  Naše specializované centrum provádí všechna vyšetření související se syfilidou, včetně těch extrémně vzácných.

  Na základě výsledků konzultace lékař vybere testovací program, který je pro váš případ nejúčinnější. Výsledek spolu s výpisem od lékaře obdržíte v co nejkratším čase.

  Pokud chcete, zůstaňte inkognito. Přísně dodržujeme lékařskou etiku.

  Náš dermatovenerolog a urolog Evgeny Aleksandrovich Volohov vede online konzultace a ví vše o syfilis. Zavolejte nám!

  Udělejte si test na syfilis v Chistye Prudy a Varshavka

  Udělejte si test na syfilis v našich klinikách denně od 9.00:21.00 do XNUMX:XNUMX

  V jižní správní oblasti a jihozápadní správní oblasti – stanice metra Varshavskaya, Kakhovskaya, Sevastopolskaya – st. Bolotnikovskaya dům 5 budova 2, tel. 8-499-317-29-72

  V centru (TsAO) – stanice metra Chistye Prudy, Turgenevskaya, Lubyanka – Krivokolenny lane, budova 10, budova 9, tel. 8-495-980-13-16